反相Flash柱层析可以干法上样吗?

过柱机biotage 25-02-14 14:48:22

反相Flash柱层析可以干法上样吗?柱层析是有机合成中常用的分离纯化手段,大公司合成实验室一般都配备自动化程度比较高的分离纯化工具---快速制备色谱仪(中低压制备色谱),在医药外包公司俗称过柱机。由名字可知,这就是个替代手工过柱的工具,他所用到的柱子我们常叫它Flash柱。除了可以用来过硅胶正相柱,还可以过乙腈(甲醇)/水体系的C18填料的反相柱,反相柱一定程度上可以替代制备液相色谱,特别是大量样品分离时,可以节省大量成本。

图片
 

往期文章: 【柱层析技术】中已经详细介绍了湿法上样和干法上样,文章中主要是介绍了硅胶柱柱层析技术,因此用过柱机过正相硅胶柱时情况类似。对于乙腈(甲醇)/水体系的C18填料的反相柱,湿法上样是应用广泛,使用简单的上样技术。如果是固体样品,只需将样品直接溶解在尽量少的溶剂中,然后注入色谱柱中即可完成上样,而如果是液体样品,其上样方式则会更简单,直接将样品注入色谱柱即可。但是湿法上样有一些缺点:1、当上样体积增大时,样品在色谱柱当中所占用的体积会增大,扩散效应也会明显增强,导致色带变宽,降低分离效率,纯度也随之降低;2、请尽量使用大极性的溶剂溶解样品,如果极性过小,样品还没有来得及和固定相相互作用,就已经被极性溶剂洗脱下色谱柱,导致保留时间不够,洗脱不充分,分离效率大大降低。特别是极性特别大的样品,湿法上样后很容易直接把样品冲出,没有分离效果。C18反相柱能否像正相硅胶柱一样,拌样后,进行干法上样呢?小编亲试,完全可以进行干法上样,缺点就是C18填料有点贵,但是拌样后的C18填料可以冲洗干净后可以重复利用。与硅胶柱的拌样类似,先用沸点较低溶剂溶解样品,加入C18硅胶后,旋干,然后将干粉转移到空柱子中,填料上方加上筛板或脱脂棉都可以,旋紧,将上样柱接在反相柱上直接过柱就可以了(建议先将反相柱平衡好,接上上样柱后直接运行梯度)。

反相柱干法上样相比湿法有以下优点:一、干法上样峰型变窄,分离效果明显提高。二、另外对于一些溶解度较差的样品,如果利用湿法上样,需要用大量的溶剂溶解,因此上样量受到限制,如果一次上太多,分离效果很差,但干法上样克服了此缺点。三、还有一些样品湿法上样注入反相柱后,直接从水相比例较高的梯度开始冲柱时,产品会迅速析出,导致柱子堵住,干法上样则很少堵柱。四、对于大极性的化合物(LCMS保留时间在0.5min以内的化合物),湿法上样,有时直接用水相就可以将化合物冲出,用干法上样则可以明显提高柱效以及分离样品纯度。

2022仪器推荐
  1. HIFU TPO200 SYSTEM 深度聚焦超声刺激系统

    HIFU TPO200 SYSTEM 深度聚焦超声刺激系统

      SONIC CONCEPTS HIFU TPO200 SYSTEM 深度聚焦系统的换能器均采用环形外延设计、超低损耗线缆和完善的阻抗匹配电路系统,并将其整体置入换能器内部,从而确保换能器的完整性和统一性. 外部尺寸非常精巧,亦适合……

    Sonic Concepts 2025-02-18

  2. VACUUBRAND PC 510 select化学真空系统

    VACUUBRAND PC 510 select化学真空系统

    VACUUBRAND PC 510 select对于需要进行电子控制蒸发或干燥过程的应用,我们的PC 500系列化学真空系统是一个很好的选择。备受欢迎的MZ 2C NT二级化学隔膜泵是这系列真空系统的核心组件,常用于含有常规溶剂的中等尺……

    VACUUBRAND,代理品牌,进口仪器 2025-01-18

  3. 美国Boekel原位杂交仪Slide Moat

    美国Boekel原位杂交仪Slide Moat

    美国Boekel原位杂交仪Slide Moat 特点: 利用PID温度控制器可以快速升温 无需等待塑料或者纸巾提供温度,加快杂交时间 加热单元有密封垫的加热玻璃盖 相对于热循环做载玻片的仪器, 该杂交仪更廉价 参数: 外形尺……

    Boekel,进口杂交箱 2025-01-21

  4. Sherwood M410火焰光度计:配有钠、钾和钙过滤器

    Sherwood M410火焰光度计:配有钠、钾和钙过滤器

    M410产品概览 Sherwood M410火焰光度计的所有三种型号都带有一个预装的滤棒,可容纳三元过滤器。过滤棒在烟囱外壳内很容易移除和更换(无需工具),因此引入替代元件特定过滤器是一个相对简单的操作。可用于所有 410……

    SHERWOOD,代理品牌,进口仪器 2025-02-02

  5. Systec台式灭菌器:45升到200升进口高压灭菌锅

    Systec台式灭菌器:45升到200升进口高压灭菌锅

      Systec D 系列台式灭菌器 Systec专门为用户提供制造灭菌柜、蒸汽灭菌器、高压灭菌器、高压灭菌锅等服务,光是Systec D 系列台式灭菌器就有六种尺寸可供选择,腔体容积从 45 L 到 200 L 。理想的内部腔体容……

    Systec 2025-02-16

  6. Biospec Mini-Beadbeater-96高通量珠磨式细胞破碎仪

    Biospec Mini-Beadbeater-96高通量珠磨式细胞破碎仪

      Biospec Mini-Beadbeater-96是一种高能量、高通量的细胞破碎仪。它可以处理一个 2 ml 深孔微孔板(96 个样品)、两个 1 ml 深孔微孔板(192 个样品),或者使用随附的 45 容量聚丙烯微量瓶架处理 0.6、1.5 或 2……

    BIOSPEC,代理品牌,进口仪器 2025-02-10

今日仪器
  1. Unchained Labs Uncle全能型蛋白稳定性分析仪

    Unchained Labs Uncle全能型蛋白稳定性分析仪

    Unchained Labs Uncle全能型蛋白稳定性分析仪 Uncle全方位的稳定性测定 Uncle结合了3种不同的检测方法——差示扫描全光谱荧光 (DSF)、静态光散射 (SLS) 和动态光散射 (DLS),让您只需用到少量的样品,即可在几个小……

    Unchained Labs 2025-02-18

  2. 上海书俊联系方式

    上海书俊联系方式

    上海书俊仪器设备有限公司是注册于上海的实验室设备贸易公司。Prime Scientific 经过了近十二年的不懈努力,建立了以纽约为基地辐射全中国的营销网络,实现了在线的ERP管理。公司主要从事制药设备,生化仪器,分析……

    公司介绍 2025-02-18

  3. Biotage Selekt快速制备液相色谱

    Biotage Selekt快速制备液相色谱

    Biotage全新一代快速纯化色谱系统Selekt,使用Biotage全新研发的操作系统,并拥有专门中文操作软件,15寸超大交互界面,保证所有功能集成于一面,操作简单,易于上手,同时系统会记住用户的使用习惯,让您发现它的……

    Biotage,过柱机 2025-02-18

返回顶部小火箭