反相Flash柱层析可以干法上样吗?
反相Flash柱层析可以干法上样吗?柱层析是有机合成中常用的分离纯化手段,大公司合成实验室一般都配备自动化程度比较高的分离纯化工具---快速制备色谱仪(中低压制备色谱),在医药外包公司俗称过柱机。由名字可知,这就是个替代手工过柱的工具,他所用到的柱子我们常叫它Flash柱。除了可以用来过硅胶正相柱,还可以过乙腈(甲醇)/水体系的C18填料的反相柱,反相柱一定程度上可以替代制备液相色谱,特别是大量样品分离时,可以节省大量成本。

往期文章: 【柱层析技术】中已经详细介绍了湿法上样和干法上样,文章中主要是介绍了硅胶柱柱层析技术,因此用过柱机过正相硅胶柱时情况类似。对于乙腈(甲醇)/水体系的C18填料的反相柱,湿法上样是应用广泛,使用简单的上样技术。如果是固体样品,只需将样品直接溶解在尽量少的溶剂中,然后注入色谱柱中即可完成上样,而如果是液体样品,其上样方式则会更简单,直接将样品注入色谱柱即可。但是湿法上样有一些缺点:1、当上样体积增大时,样品在色谱柱当中所占用的体积会增大,扩散效应也会明显增强,导致色带变宽,降低分离效率,纯度也随之降低;2、请尽量使用大极性的溶剂溶解样品,如果极性过小,样品还没有来得及和固定相相互作用,就已经被极性溶剂洗脱下色谱柱,导致保留时间不够,洗脱不充分,分离效率大大降低。特别是极性特别大的样品,湿法上样后很容易直接把样品冲出,没有分离效果。C18反相柱能否像正相硅胶柱一样,拌样后,进行干法上样呢?小编亲试,完全可以进行干法上样,缺点就是C18填料有点贵,但是拌样后的C18填料可以冲洗干净后可以重复利用。与硅胶柱的拌样类似,先用沸点较低溶剂溶解样品,加入C18硅胶后,旋干,然后将干粉转移到空柱子中,填料上方加上筛板或脱脂棉都可以,旋紧,将上样柱接在反相柱上直接过柱就可以了(建议先将反相柱平衡好,接上上样柱后直接运行梯度)。
反相柱干法上样相比湿法有以下优点:一、干法上样峰型变窄,分离效果明显提高。二、另外对于一些溶解度较差的样品,如果利用湿法上样,需要用大量的溶剂溶解,因此上样量受到限制,如果一次上太多,分离效果很差,但干法上样克服了此缺点。三、还有一些样品湿法上样注入反相柱后,直接从水相比例较高的梯度开始冲柱时,产品会迅速析出,导致柱子堵住,干法上样则很少堵柱。四、对于大极性的化合物(LCMS保留时间在0.5min以内的化合物),湿法上样,有时直接用水相就可以将化合物冲出,用干法上样则可以明显提高柱效以及分离样品纯度。
-
Sonics VCX800大体积样品适用于的超声波破碎仪
大体积样品适用于的超声波破碎仪VCX800 产品特点 1、功率为800W,处理样品体积为200ul至数升 2、集成温度控制器防止样品过热,监测并控制样品处理温度在1-100℃范围内 3、密封式变频器,隔离水汽、灰尘和腐蚀性气……
-
奥豪斯便携式溶解氧测定仪OHAUS ST 300D
奥豪斯公司电化学产品ST系列又迎来了新成员!ST 300D是一款原电池原理的便携式溶解氧测定仪,其设计布局合理,简洁易用,集成了多种功能;可广泛应用于环境监测,食品饮料,水产养殖等各个行业。ST 300D符合中国……
-
SinapTec LabHF for Cup Horn超声波处理系统
典型应用 •酶/DNA提取 •反应加速 •细菌破坏 •声化学 •细胞溶解 •提取… 特点: NexTgen实验室高频发生器 •功率:1000WRMS •振幅设置:10%–100% •工作频率:固定频率 •尺寸(长x宽x高):400x142x148mm •通过干触点、……
-
Prime-PA-MSC64颜色/光照度测量方案:显示屏MURA穆拉检测
Prime-PA-MSC64 更好的颜色、光照度测量方案 PA-MSC64非接触型分光测色仪/分光光度计/色差仪/光照度检测仪 支持在线和工业应用量身定制 多光谱相机MSC 64是一种超高分辨率成像光和颜色测量设备。它的两个滤光轮……
-
BUCHI L-200冷冻干燥机:配备Infinite-Control的冻干机
BUCHI L-200冷冻干燥机:配备 Infinite-Control™ 的冷冻干燥机 配备 Infinite-Control™ 的冷冻干燥机,这款紧凑型冷冻干燥机 L-200 可提供自动化升华。可实时轻松创建和运行方法、记录数据、记录图表,并可使用移……
-
INTERSCIENCE JumboGravimat大容量重量稀释器
INTERSCIENCE JumboGravimat 大重量稀释器是一款可稀释样品到5000g的重量稀释器。它被大力推从做实验室大肠杆菌分析,儿童奶粉,巧克力,无菌性,隐孢子虫,旋毛行线虫,沙门氏菌和贾第虫属寄生虫,样品测试池。(……
-
The Ultran Group Square Transducers 方形换能器
The Ultran Group Square Transducers Designed for use in air and other non-corrosive gaseous environments. All units built standard with aluminum housing and BNC connectors. Models at frequencies o……
-
BUCHI旋转蒸发仪R-100:经济型蒸发解决方案
BUCHI旋转蒸发仪R-100:经济型蒸发解决方案 BUCHI旋转蒸发仪R-100 是一款入门级旋转蒸发仪,旨在满足经济蒸发的基本需要,符合 BUCHI 高品质标准。 蒸发瓶尺寸:50 – 4000 mL 升降机制:手动 温度范围:20 – 95 °C……
-
MINITECH CNC Mini-Mill/3 纳米级微铣削加工系统
MINITECH CNC Mini-Mill/3 CNC Mini-Mill/3市场上实惠的航空级铝框架、微铣削加工系统。 Minitech Mini Mill/3使用THK笼式滚珠线性轴承和高精度滚珠螺杆用于所有阶段。这与大型CNC具有的高质量组件相同。 M……
