反相Flash柱层析可以干法上样吗?

过柱机biotage 26-04-07 11:47:00

反相Flash柱层析可以干法上样吗?柱层析是有机合成中常用的分离纯化手段,大公司合成实验室一般都配备自动化程度比较高的分离纯化工具---快速制备色谱仪(中低压制备色谱),在医药外包公司俗称过柱机。由名字可知,这就是个替代手工过柱的工具,他所用到的柱子我们常叫它Flash柱。除了可以用来过硅胶正相柱,还可以过乙腈(甲醇)/水体系的C18填料的反相柱,反相柱一定程度上可以替代制备液相色谱,特别是大量样品分离时,可以节省大量成本。

图片
 

往期文章: 【柱层析技术】中已经详细介绍了湿法上样和干法上样,文章中主要是介绍了硅胶柱柱层析技术,因此用过柱机过正相硅胶柱时情况类似。对于乙腈(甲醇)/水体系的C18填料的反相柱,湿法上样是应用广泛,使用简单的上样技术。如果是固体样品,只需将样品直接溶解在尽量少的溶剂中,然后注入色谱柱中即可完成上样,而如果是液体样品,其上样方式则会更简单,直接将样品注入色谱柱即可。但是湿法上样有一些缺点:1、当上样体积增大时,样品在色谱柱当中所占用的体积会增大,扩散效应也会明显增强,导致色带变宽,降低分离效率,纯度也随之降低;2、请尽量使用大极性的溶剂溶解样品,如果极性过小,样品还没有来得及和固定相相互作用,就已经被极性溶剂洗脱下色谱柱,导致保留时间不够,洗脱不充分,分离效率大大降低。特别是极性特别大的样品,湿法上样后很容易直接把样品冲出,没有分离效果。C18反相柱能否像正相硅胶柱一样,拌样后,进行干法上样呢?小编亲试,完全可以进行干法上样,缺点就是C18填料有点贵,但是拌样后的C18填料可以冲洗干净后可以重复利用。与硅胶柱的拌样类似,先用沸点较低溶剂溶解样品,加入C18硅胶后,旋干,然后将干粉转移到空柱子中,填料上方加上筛板或脱脂棉都可以,旋紧,将上样柱接在反相柱上直接过柱就可以了(建议先将反相柱平衡好,接上上样柱后直接运行梯度)。

反相柱干法上样相比湿法有以下优点:一、干法上样峰型变窄,分离效果明显提高。二、另外对于一些溶解度较差的样品,如果利用湿法上样,需要用大量的溶剂溶解,因此上样量受到限制,如果一次上太多,分离效果很差,但干法上样克服了此缺点。三、还有一些样品湿法上样注入反相柱后,直接从水相比例较高的梯度开始冲柱时,产品会迅速析出,导致柱子堵住,干法上样则很少堵柱。四、对于大极性的化合物(LCMS保留时间在0.5min以内的化合物),湿法上样,有时直接用水相就可以将化合物冲出,用干法上样则可以明显提高柱效以及分离样品纯度。

仪器推荐
  1. Boekel Scientific RapidFISH 载玻片杂交仪,240200

    Boekel Scientific RapidFISH 载玻片杂交仪,240200

    Boekel Scientific RapidFISH 旨在简化 FFPE(福尔马林固定石蜡包埋组织)样品、细胞悬液和其他组织制备程序的荧光原位杂交 (FISH) 程序。温度控制和湿度对于 FISH 探针与 RNA 和 DNA 结合至关重要。RapidFISH 具有……

    Boekel,进口杂交箱 2026-04-07

  2. Organomation MULTIVAP氮吹仪 100位水浴氮吹仪

    Organomation MULTIVAP氮吹仪 100位水浴氮吹仪

    【产品型号】:MULTIVAP氮吹仪 100位 【产品特点】: 结构紧凑,占地小 使用氮气或空气吹扫样品表面 恒温控制,水浴提供温和加热 可拆除引导管以适应大容量样品 底部装有弹簧支撑装置,可方便的升降直接进出 可容……

    Organomation 2026-04-09

  3. FluxData FD-MA1045IL在线式双通道多角度色差测量仪

    FluxData FD-MA1045IL在线式双通道多角度色差测量仪

    FluxData FD-MA1045IL是一种双角度分光测色仪,设计用于测量10度和45度光照下材料的反射外观。内联系统利用多个分光光度计提供快速测量,以捕获表面的直接镜面反射和散射光,并补偿随时间变化的照明。该系统的光学……

    FluxData,代理品牌,测色仪,进口仪器 2026-04-02

  4. LAUDA ECO恒温浴槽:用于玻璃颗粒耐水性试验

    LAUDA ECO恒温浴槽:用于玻璃颗粒耐水性试验

    玻璃的耐水性,用于评估玻璃材料是否适合与水接触,是用于衡量玻璃质量的一项重要标准。比如在药典中,按照耐水性,玻璃被划分 I 类、II 类、III 类,其中,I 类高品质硼硅玻璃可用于注射剂类药物包装,而III 类钠……

    LAUDA,进口温控 2026-04-07

  5. Interscience FlexiPump Scale液体分装称重蠕动泵

    Interscience FlexiPump Scale液体分装称重蠕动泵

    FlexiPump Scale是一款液体分装泵,结合了蠕动泵的强大功能与集成称重平台的高精度。能够满足严格的实验室要求。FlexiPump Scale是一个适用于各种应用的完整解决方案。 分装模式:连续分装 - 单次分装 - 多次分装……

    Interscience 2026-04-01

  6. 进口大容量双扉洗瓶机SMEG GW7010

    进口大容量双扉洗瓶机SMEG GW7010

    SMEG GW7010大容量双扉洗瓶机(266升) •洗涤温度高达95°C-抗菌热消毒 •5层高度可调节清洗位 •程序:20个默认+20个自定义 •两侧多语言TFT彩色触摸屏 •功能受到不同级别密码的保护 •USB端口,用于下载洗涤周期日……

    SMEG洗瓶机 2026-03-30

今日仪器
  1. Sonics VCX500/VCX750超声波细胞破碎仪

    Sonics VCX500/VCX750超声波细胞破碎仪

      Sonics VCX 500 / VCX 750:适用于中小批量应用的超声波处理器 500 和 750 瓦超声波处理器可安全处理各种有机和无机材料,从 250 微升到 1 升*。典型应用包括纳米技术(生产纳米颗粒材料和石墨烯分散体)、细……

    Sonics,超声破碎仪 2026-04-09

  2. Chemglass 20L无夹套工艺反应釜 CG-1966/CG-1967

    Chemglass 20L无夹套工艺反应釜 CG-1966/CG-1967

    CG-1966 CG-1967 20L 无夹套20L 工艺反应釜,圆柱形,无夹套,电动或气动马达在我们新的露天自动定心支架上完成反应器系统。请注意:反应器支架总高度(电机和阀门下方间隙)是针对所有 CHEMGLASS 搅拌器轴承(……

    Chemglass 2026-04-09

  3. Biospec Mini-Beadbeater-96高通量珠磨式细胞破碎仪

    Biospec Mini-Beadbeater-96高通量珠磨式细胞破碎仪

      Biospec Mini-Beadbeater-96是一种高能量、高通量的细胞破碎仪。它可以处理一个 2 ml 深孔微孔板(96 个样品)、两个 1 ml 深孔微孔板(192 个样品),或者使用随附的 45 容量聚丙烯微量瓶架处理 0.6、1.5 或 2……

    BIOSPEC,代理品牌,进口仪器 2026-04-09

返回顶部小火箭