反相Flash柱层析可以干法上样吗?

过柱机biotage 26-01-21 16:53:50

反相Flash柱层析可以干法上样吗?柱层析是有机合成中常用的分离纯化手段,大公司合成实验室一般都配备自动化程度比较高的分离纯化工具---快速制备色谱仪(中低压制备色谱),在医药外包公司俗称过柱机。由名字可知,这就是个替代手工过柱的工具,他所用到的柱子我们常叫它Flash柱。除了可以用来过硅胶正相柱,还可以过乙腈(甲醇)/水体系的C18填料的反相柱,反相柱一定程度上可以替代制备液相色谱,特别是大量样品分离时,可以节省大量成本。

图片
 

往期文章: 【柱层析技术】中已经详细介绍了湿法上样和干法上样,文章中主要是介绍了硅胶柱柱层析技术,因此用过柱机过正相硅胶柱时情况类似。对于乙腈(甲醇)/水体系的C18填料的反相柱,湿法上样是应用广泛,使用简单的上样技术。如果是固体样品,只需将样品直接溶解在尽量少的溶剂中,然后注入色谱柱中即可完成上样,而如果是液体样品,其上样方式则会更简单,直接将样品注入色谱柱即可。但是湿法上样有一些缺点:1、当上样体积增大时,样品在色谱柱当中所占用的体积会增大,扩散效应也会明显增强,导致色带变宽,降低分离效率,纯度也随之降低;2、请尽量使用大极性的溶剂溶解样品,如果极性过小,样品还没有来得及和固定相相互作用,就已经被极性溶剂洗脱下色谱柱,导致保留时间不够,洗脱不充分,分离效率大大降低。特别是极性特别大的样品,湿法上样后很容易直接把样品冲出,没有分离效果。C18反相柱能否像正相硅胶柱一样,拌样后,进行干法上样呢?小编亲试,完全可以进行干法上样,缺点就是C18填料有点贵,但是拌样后的C18填料可以冲洗干净后可以重复利用。与硅胶柱的拌样类似,先用沸点较低溶剂溶解样品,加入C18硅胶后,旋干,然后将干粉转移到空柱子中,填料上方加上筛板或脱脂棉都可以,旋紧,将上样柱接在反相柱上直接过柱就可以了(建议先将反相柱平衡好,接上上样柱后直接运行梯度)。

反相柱干法上样相比湿法有以下优点:一、干法上样峰型变窄,分离效果明显提高。二、另外对于一些溶解度较差的样品,如果利用湿法上样,需要用大量的溶剂溶解,因此上样量受到限制,如果一次上太多,分离效果很差,但干法上样克服了此缺点。三、还有一些样品湿法上样注入反相柱后,直接从水相比例较高的梯度开始冲柱时,产品会迅速析出,导致柱子堵住,干法上样则很少堵柱。四、对于大极性的化合物(LCMS保留时间在0.5min以内的化合物),湿法上样,有时直接用水相就可以将化合物冲出,用干法上样则可以明显提高柱效以及分离样品纯度。

仪器推荐
  1. Organomation MULTIVAP氮吹仪 100位水浴氮吹仪

    Organomation MULTIVAP氮吹仪 100位水浴氮吹仪

    【产品型号】:MULTIVAP氮吹仪 100位 【产品特点】: 结构紧凑,占地小 使用氮气或空气吹扫样品表面 恒温控制,水浴提供温和加热 可拆除引导管以适应大容量样品 底部装有弹簧支撑装置,可方便的升降直接进出 可容……

    Organomation 2026-01-15

  2. PiezoCAD软件应用说明:PiezoCAD软件侦测各种类型的电子原件

    PiezoCAD软件应用说明:PiezoCAD软件侦测各种类型的电子原件

    PiezoCAD可以设计超声的软件,支持电子模拟,半导体模拟,电子元器件模拟,电路模拟等 PiezoCAD利用一系列矩阵技术和数据组对比应用去解析整体超声系统参数,从各类电器原件到前端声场通道.用户可以从软体中海量的压电……

    Sonic Concepts,代理品牌,进口仪器 2026-01-02

  3. Sonics VCX 2500:用于大批量和工业应用的超声波处理器

    Sonics VCX 2500:用于大批量和工业应用的超声波处理器

      Sonics VCX 2500:用于大批量和工业应用的超声波处理器 带风冷转换器的2500 瓦超声波处理器。能够批量处理多达 50 升*。典型应用包括工业混合(包括纳米材料的大规模加工)和工业加工(包括乳化、脱气和大规模……

    Sonics,代理品牌,进口仪器 2026-01-05

  4. BUCHI B-290小型喷雾干燥仪:喷雾干燥研发解决方案

    BUCHI B-290小型喷雾干燥仪:喷雾干燥研发解决方案

    BUCHI B-290小型喷雾干燥仪:喷雾干燥研发解决方案 小型喷雾干燥仪 B-290 基于我们 30 多年的喷雾干燥经验,以出色的效率和灵活性著称。让我们来了解一下为什么数以千计的研发出版物依赖于该喷雾干燥仪的成熟性能……

    BUCHI 2026-01-01

  5. VACUUBRAND ME 4C NT 化学隔膜泵

    VACUUBRAND ME 4C NT 化学隔膜泵

    VACUUBRAND化学隔膜泵 ME 4C NT专为化学设计的隔膜泵是针对腐蚀性气体和蒸汽的一种持续的、无油抽气的解决方案。单级泵的结构同时具有抽气速度大和达70mbar的真空的优点。所有与被抽介质接触的主要部件均由化学防……

    VACUUBRAND 2025-12-26

  6. 上海书俊公司简介

    上海书俊公司简介

    上海书俊仪器设备有限公司成立于2013年,致力于将全球的仪器和技术引入中国,为高校,科研院所,企业等系统客户提供完整的解决方案及优质的售后服务。现在全国设有北京、广州、武汉、南京、杭州、厦门、西安、成都……

    公司介绍 2026-01-21

今日仪器
  1. DRUMMOND手持显微注射器

    手持显微注射器:DRUMMOND    手持显微注射器其简单的构造,结合微量移液的功能特点以及玻璃毛细管可更换针尖,可以进行nL到uL微量液体显微注射,是哺乳动物幼体、斑马鱼/昆虫等幼体显微注射及爪蟾/斑马鱼/昆虫……

    Drummond 2026-01-26

  2. Biospec Mini-Beadbeater-24珠磨器

    Biospec Mini-Beadbeater-24珠磨器

    Biospec Mini-Beadbeater-24 可破碎多达 24 个微生物或组织样本,效率高于 95%。细胞在密封系统中被快速安全地破坏。该设备易于清洁、占地面积小且基本上无需维护。与 Minibeadbeater-16 相比,Mini-24 添加了XJ的……

    BIOSPEC,代理品牌,进口仪器 2026-01-26

  3. 奥豪斯水分分析仪OHAUS MB90

    奥豪斯水分分析仪OHAUS MB90

    OHAUS MB90 水分分析仪 快速精准的水分测定仪 水分测定从未如此简便。MB90的卤素加热系统可均匀加热并快速获得精确的测试结果。腔体部件无需特殊工具即可快速装卸,易于清洁保养。 MB90 水分分析仪 特征   &……

    OHAUS 2026-01-26

返回顶部小火箭